碘化乙啶(HI),Ethidium Iodide可用于核酸染色与细胞分析
试剂名称:碘化乙啶(HI),Ethidium Iodide
储存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋运输。
产地:西安强化生物
CAS:211566-66-4
分子式:C25H28IN3
分子量:497.41
一、描述与基本特性:
碘化乙啶是一种菲啶鎓类核酸染色剂,属于中等亲脂性荧光染料。
与DNA结合后,激发波长(Ex)518 nm,发射波长(Em)600 nm,发出橙红色荧光。
荧光强度与DNA结合量成正比,适用于定量分析。
应用领域
(一)核酸染色与细胞分析
作用机制:嵌入DNA双螺旋碱基对,结合后荧光强度增强(游离态荧光微弱)。
细胞通透性:可穿透哺乳动物细胞膜,染色细胞质、细胞核,线粒体与核仁也可能着色。
(二)微生物学检测
革兰氏阳性菌选择性染色:
在含革兰氏阴性菌的环境中,特异性染色几乎全部革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)。
需经EDTA预处理以渗透细菌细胞壁,结合DNA后显荧光。
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应用示例:评估巨噬细胞对细菌的吞噬能力 。
(三)其他生物分析
检测核酸结合蛋白、酵母、霉菌;
分析多核苷酸结构、核酸扩增;
测量膜电位/跨膜电位。
二、常见问题
能否用于哺乳动物细胞核染色?
→ 不推荐。可能污染其他细胞器(如线粒体),建议选用专用核染料(如DAPI)。
染色失败的可能原因?
→ ① 细菌未充分透化(革兰氏阴性菌需EDTA预处理);② 光照导致淬灭;③ DMSO浓度过高影响活性。
以上由西安强化生物小编xxn整理
用于科研相关领域,不能用于人体实验!
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